Artículos de revista
Permanent URI for this collectionhttps://repositorio.inprf.gob.mx/handle/123456789/5
Browse
9 results
Search Results
Item Estudio de liberación in vitro de péptidos opioides en terminales nerviosas aisladas(1995) Asai, Miguel; Agustín, Pablo; Benítez-King, Gloria; Laboratorio de Análisis Químicos. División de Neurociencias. Instituto Mexicano de Psiquiatría, Calz. México-Xochimilco 101, col. San Lorenzo Huipulco 14370, México, D.F.Actualmente se reconoce el papel modulador de los péptidos opioides en la homeostasis celular. Los péptidos opioides se han detectado por microscopia electrónica en vesículas electrodensas de las terminales nerviosas. También, se ha establecido que la liberación in vitro de encefalinas, a partir de rebanadas del cuerpo estriado es dependiente de calcio y se produce por la presencia de potasio como agente despolarizante. No obstante, los mecanismos moleculares que subyacen en la liberación de encefalinas no se conocen. Se sabe que el complejo calcio-calmodulina (Ca2+-CaM), participa en la liberación de neurotransmisores por la activación de la multiproteína cinasa II (MPKII). También se conoce que la proteína cinasa C (PKC), cuando es activada por PMA (éster de forbol), fosforila a la GAP-43 y a las MARCS presentes en las membranas de las vesículas sinápticas promoviendo la exocitosis. En el presente trabajo, se estudió la posible participación de la calmodulina (CaM) y PKC en la liberación in vitro de péptidos opioides, en terminales nerviosas aisladas (sinaptosomas), obtenidas de la amígdala del lóbulo temporal de la rata y se utilizó a la trifluoroperazina (TFP) y al compuesto W7 como antagonistas de la CaM y a un éster de forbol, el PMA como activador de la PKC. Un grupo de ratas macho de la cepa Wistar (200-250 g), se sacrificaron por decapitación, el cerebro se removió con rapidez y la amígdala se disecó y se colocó en sacarosa 0.32 M a 4°C. Una vez obtenidos los sinaptosomas se realizaron los experimentos de liberación, utilizando potasio (55 mM) como agente despolarizante y al dipéptido Phe-Ala (1 mM) como inhibidor de la encefalinasa. La recolección de las muestras se realizó cada 5 min (liberación basal, alto potasio y postestímulo). La concentración de IR-met-encefalina, IR-leu-encefalina, IR-ME-Arg6-Phe7 e IR-ME-Arg6-Gly7-leu8 fue medida con la técnica de radioinmunoensayo. Los resultados señalaron que el EGTA a una concentración de 1 mM, redujo significativamente la liberación de opioides (65%). La presencia del TFP y W7 en un margen micromolar redujo significativamente la liberación de met-encefalina, hepta y octapéptido; sin embargo, no tuvieron efecto sobre la liberación de leu-encefalina. Por el contrario, el PMA (1 µ M) aumentó significativamente la liberación de leu-encefalina (67%), pero no modificó la liberación evocada de met-encefalina. Los resultados indican que los péptidos opioides se liberan presinápticamente a partir de sus terminales nerviosas, su secreción es dependiente de calcio y de naturaleza selectiva. El complejo Ca2+ -CaM podría regular la liberación de met-encefalina, heptapéptido y del octapéptido y la PKC la liberación de leu-encefalina.Item La unidad hipotálamo-hipófisis de Ambistoma mexicanum y los cambios en la concentración de encefalinas a lo largo de las diferentes etapas de la metamorfosis inducida con tiroxina (T4)(1993) Cano Martínez, Agustina; Asai Camacho, Miguel; Investigadores del Laboratorio de Análisis Químicos de la División de Investigaciones en Neurociencias. Instituto Mexicano de Psiquiatría. Calz. México-Xochimilco 101, Col. San Lorenzo huipulco, 14370 México, D.F.En este trabajo se cuantificó la concentración de inmunorreactividad (IR) para encefalinas mediante el método de radioinmunoanálisis en el diencéfalo y la hipófisis (unidad hipotálamo-hipófisis) de Ambystoma mexicanum durante las diferentes etapas de la metamorfosis inducida por una inyección intraperitoneal de tiroxina (T4) en una dosis de 2.5 microgramos/g. Los cambios en la concentración de Met-encefalina (IR-ME) entre el diencéfalo y la hipófisis fueron opuestos a lo largo de la metamorfosis. Al final del proceso (etapa IV), la concentración de IR-ME en la hipófisis descendió en un 50% respecto a los valores premetamórficos. En contraste, al final de la metamorfosis se duplicaron los valores en el diencéfalo, respecto al control. Los cambios en la concentración de Leu-encefalina (IR-LE) fueron paralelos en las dos estructuras, y presentarón un patrón bifásico. La concentración de IR-LE se incremento en el diencéfalo en la etapa I y en la hipófisis en la II. Posteriormente, en ambas estructuras disminuyeron los valores de IR-LE en un 50 % con respecto a los valores premetamórficos. Nuestros resultados sugieren la existencia de una relación entre la metamorfosis y las encefalinas de la unidad hipotálamo-hipófisis en A. mexicanum. Con los datos que encontramos no podemos saber con precisión si los cambios en la concentración de estos peptidos opioides implican una relación causa o efecto. Sin embargo, la clara asociación de la metamorfosis con los cambios neuroendócrinos hipófiso-dependientes, apoyan la hipótesis de que las encefalinas podrían interactuar con otros mensajeros clínicos en la regulación de las funciones neurohipofisiarias que subyacen a la metamorfosis de los anfibios.Item Liberación in vitro de la inmunorreactividad a met- y a leu- encefalinas en el ganglio periesofágico completo del caracol Helix aspersa(1993) Pellicer, Francisco; Asai, Miguel; León Olea, Martha; Sánchez-Álvarez, Marcela; Laboratorio de Neurofisiología del Instituto Mexicano de PsiquiatríaSe estudió el mecanismo de liberación de material inmunorreactivo a met- y leu- encefalinas por el método de radioinmunoensayo (RIA) con antisueros altamente específicos, en el ganglio periesofágico del caracol Helix aspersa. La liberación se midió bajo tres distintas situaciones experimentales: a) liberación basal, b) durante la despolarización con alto potasio, y c) sin Ca2+. Los resultados muestran que los mecanismos de liberación estan presentes y son Ca2+ dependientes. Esta preparación es un buen modelo para investigar la liberación de peptidos opioides bajo condiciones fisiológicas y patológicas experimentales.Item Variación estacional de la inmunorreactividad a LEU- y MET- encefalinas en los ganglios periesofágicos del caracol Helix aspersa(1991) Sánchez-Álvarez, Marcela; León-Olea, Martha; Laboratorio de Histología, División de Investigaciones en Neurociencias. Instituto Mexicano de Psiquiatría, Calz. México-Xochimilco 101, Col. San Lorenzo Huipulco, 14370 México, D.F.En los ganglios periesofágicos del caracol de jardín Helix aspersa existen neuronas y fibras inmunorreactivas a leucina y metionina encefalinas. Esta inmunorreactividad presenta cambios en su intensidad a lo largo del año. Por medio de técnicas inmunohistoquímicas se estudió la variación de la inmunorreactividad presente en las neuronas y en las fibras de los ganglios periesofágicos. Este estudio abarcó un intervalo de año y medio. Se observó el cambio global en la inmunorreactividad neuronal en diferentes épocas del año, así como los cambios en zonas neuronales específicas. Encontramos que la inmunorreactividad de ambas encefalinas es alta durante los meses de primavera, verano y otoño, y baja o nula en los meses de invierno.Item La melatonina induce la síntesis y liberación de las encefalinas en el cerebro de la rata(Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente Muñiz, Calz. México-Xochimilco 101, Col. San Lorenzo Huipulco, Tlalpan, México, D.F. Tel. 4160-5000., 2010) Asai, Miguel; Valdés-Tovar, Marcela; Matamoros-Trejo, Gilberto; García, David; Laboratorio de Análisis Químicos. División de Investigaciones en Neurociencias. Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente Muñiz; asaicm@imp.edu.mxEn la actualidad se reconoce que el Sistema Endógeno Opioide (SEO) participa en la regulación y control de la homeostasis; por lo tanto se requiere que los procesos bioquímicos que dan lugar a su síntesis, liberación y unión a receptores se encuentren reguladas de manera endocrina. Diversas líneas de investigación han demostrado que la concentración y liberación presináptica de las encefalinas no permanece constante durante un ciclo de 24 horas. Por el contrario, su síntesis y liberación alcanzan su máxima concentración durante la fase de oscuridad y la mínima durante las primeras horas de la mañana. Recientemente, nuestro grupo de trabajo ha demostrado que la ausencia de melatonina (MEL), por efecto de la pinealectomía funcional, rompe el ritmo circádico y reduce significativamente la concentración de las encefalinas durante la fase de oscuridad. Si la ausencia de la hormona abate la concentración de opioides, es factible que la MEL se encuentre involucrada en la síntesis de las encefalinas. En el presente trabajo se muestran los resultados del efecto de la pinealectomía funcional sobre la concentración tisular y la liberación de los opioides, así como el efecto de la administración exógena de MEL y de su antagonista el luzindol (LZ).Item Mapeo cortical que muestra el efecto de las encefalinas en un foco epiléptico(Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente Muñiz, Calz. México-Xochimilco 101, Col. San Lorenzo Huipulco, Tlalpan, México, D.F. Tel. 4160-5000., 2005) Martínez, Adrián; Fernández-Mas, Rodrigo; Valdés-Cruz, Alejandro; Magdaleno-Madrigal, Víctor; Fernández-Guardiola, Augusto; Subdirección de Investigación en Neurociencias del Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la FuenteIntroducción. La actividad epiléptica modifica el sistema de los opioides endógenos al aumentar su concentración al término de la fase ictal, en la fase postictal y durante la fase interictal. Este aumento genera un efecto excitador cortical que suprime el sueño de ondas lentas y el sueño de movimientos oculares rápidos. La actividad epiléptica se inicia con la aparición de una actividad epileptiforme interictal (AEI), la cual se puede inducir con penicilina en los núcleos amigdalinos. La AEI es una herramienta muy usada para determinar la localización de un foco epiléptico, la cual se describe como la aparición abrupta de espigas o de ondas agudas en el electroencefalograma (EEG). En el presente trabajo se utilizó esta herramienta para estudiar la participación del sistema opioide en la instalación y la propagación de la actividad epileptiforme inducida en la amígdala del lóbulo temporal. La epileptogénesis se estudió utilizando la AEI amigdalina para observar los cambios inducidos por los opioides y su antagonista en la ocurrencia de la actividad interictal por medio de un histograma de eventos. La propagación se estudió empleando la técnica del mapeo topográfico cortical, el cual nos muestra los componentes de frecuencia del EEG por medio del espectro de potencia, así como la evolución de los patrones rítmicos del EEG. El objetivo del presente estudio fue analizar el efecto de las encefalinas en la actividad epiléptica inducida por la penicilina en la amígdala del lóbulo temporal y su propagación hacia la corteza cerebral. Método. Se utilizaron 15 ratas macho de la cepa Wistar, en preparación aguda y anestesiadas con uretano (1.2 gr/kg i.p.). Se dirigió un electrodo bipolar de acero inoxidable unido a una cánula hacia el núcleo basolateral amigdalino izquierdo y un electrodo bipolar concéntrico hacia el núcleo basolateral amigdalino derecho. Se realizaron dos tipos de registro cortical: un mapeo global y otro de áreas restringidas. El primero consistió en la colocación de una matriz de 16 electrodos de acero inoxidable (tras eliminar los electrodos del vértex) sobre el cráneo, procurando que la punta del electrodo tocara la corteza y cubriendo toda la corteza cerebral. El segundo se realizó colocando sobre la corteza cerebral una matriz cuadrada de 4x4mm, que contenía 16 electrodos distribuidos equidistantemente. El registro cortical se obtuvo colocando la matriz cuadrada en cuatro posiciones diferentes, a fin de cubrir así toda la corteza cerebral. A los grupos experimentales se administró penicilina G sódica (Pn), que se inyectó en los núcleos amigdalinos para realizar registros corticales. En el caso del mapeo global, las encefalinas [D-Ala2]-metionina y [D-Ala2]-leucina se aplicaron tópicamente en los núcleos amigdalinos; a su vez la naloxona fue administrada sistémicamente. Las señales analógicas se grabaron en cinta de video y paralelamente se digitalizaron en una estación de trabajo HP. El análisis fuera de línea se realizó de la siguiente forma: a) la señal grabada en las cintas de video se transfirió a una computadora de uso específico, utilizando la AEI amigdalina para realizar los histogramas de eventos; b) la señal digitalizada del EEG, que se obtuvo del mapeo global, se utilizó para obtener el análisis espectral, el cual consistió en elaborar imágenes en color de mapas en el dominio del tiempo y la frecuencia con el programa RBEAM. El registro de la actividad eléctrica cerebral obtenida por la matriz cuadrada sólo se analizó visualmente. Al final de cada experimento se procedió a perfundir la sangre y a fijar intracardialmente el cerebro con formaldehído al 10%. Para verificar los sitios de registro e inyección subcorticales, se utilizó la técnica del procedimiento rápido. Resultados. En el registro cortical se observó, en la situación control, una actividad lenta en forma de husos, en todos los canales, inducida por el uretano. La aplicación de Pn en los núcleos amigdalinos indujo una actividad epileptiforme de la siguiente forma; aparición inmediata después de su aplicación y un aumento gradual de su amplitud hasta estabilizarse a los 5-10 minutos de su aplicación. Con el análisis del mapeo global en el dominio de las frecuencias, se observó el siguiente orden de propagación de la AEI amigdalina: se inició en las cortezas temporal, prefrontal y frontal ipsilateral; después apareció en las cortezas prefrontal y frontal, y, por último, en la corteza temporal contralateral. En el dominio del tiempo, se observó un dipolo eléctrico que generó una espiga interictal en la corteza cerebral. Los mapeos de las áreas restringidas mostraron la localización frontotemporal ipsilateral de la AEI y su propagación. Los datos revelan una activación cortical medial antero-posterior de intensidad decreciente hacia las regiones occipitales. La aplicación de las encefalinas [D-Ala2]-metionina y la [D-Ala2]-leucina, no produjo actividad epiléptica, pero sí se observó un aumento en la basal del EEG de la actividad epileptiforme cortical y una disminución de la amplitud y la frecuencia de la AEI amigdalina. La naloxona produjo un efecto facilitador, ya que su administración indujo crisis focales y generalizadas electrocorticográficas. Conclusiones. Considerando que la aplicación de Pn focal es un modelo confiable de espigas interictales, de paroxismos y de crisis generalizadas, su aplicación en el cerebro de la rata mostró una propagación de la actividad epileptiforme amigdalina que se dirigió más hacia las cortezas prefrontales que a la amígdala contralateral. Nuestros resultados muestran que las encefalinas producen un doble efecto. El primero consiste en un aumento en la basal del EEG en las áreas corticales temporales, que podrían estar participando en los mecanismos de propagación. El segundo efecto es la inhibición de los mecanismos de instalación de la epilepsia. El efecto de inhibición generado por las encefalinas fue revertido por la naloxona.Item Liberación in vitro de encefalinas durante la depresión postictal y la actividad interictal(1994) Asai, Miguel; Laboratorio de Análisis Químicos. División de Neurociencias. Instituto Mexicano de PsiquiatríaLos péptidos opioides han sido propuestos como agentes inhibidores de la aparición, propagación y severidad de una crisis convulsiva. Su posible participando en los procesos epilépticos implica su liberación a partir de las terminales nerviosas que las contienen. El propósito del presente trabajo fue el de estudiar en diversas estructuras del cerebro de la rata, la liberación in vitro de encefalinas durante la fase ictal, depresión postictal y actividad interictal. Los experimentos se hicieron en ratas macho de la cepa wistar, las cuales fueron sometidas al kindling químico mediante la administración, por vía intraperitoneal, de una dosis diaria de 30 mg/kg de pentilenetetrazol, y fueron sacrificadas durante la fase ictal y de depresión postictal. La actividad interical se estudió al aplicar, en forma crónica, 50 UI de penicilina-G sódica en la amigadala del lóbulo temporal. La concentracción de encefalinas se midió por medio de la técnica de radioinmunoensayo. Los resultados obtenidos muestran que la liberación in vitro de encefalinas, provocada por potasio, aumenta significativamente durante la depresión postictal y la actividad interictal. El defecto es de naturaleza selectiva en cuanto a la estructura y el péptido analizado. Estos datos apoyan la hipótesis concerniente a la participación de las encefalinas en los mecanismos que subyacen en la depresión postictal y la actividad interictal.Item Concentración y liberación in vitro de encefalinas en el cerebro de la rata sometida al etanol en forma crónica y aguda(1991) Asai Camacho, Miguel; Matamoros-Trejo, Gilberto; Cano-Martínez, Agustina; Aramburo de la Hoz, Carlos; Laboratorio de Análisis Químico. División de Neurociencias, Instituto Mexicano de Psiquiatría. Calz. México-Xochimilco 101, Col. San Lorenzo Huipulco, Tlalpan, 14370, México, D.F.A principios de siglo se estableció que el etanol altera la permeabilidad de la membrana a través de mecanismos inespecíficos. Recientemente, con el uso de técnicas muy sensibles como la Resonancia Paramagnética del Electrón, se ha podido establecer que dosis muy bajas de etanol incrementan la fluidez de la membrana. Se ha propuesto inclusive, la existencia de microdominios dentro de la membrana neuronal, con una sensibilidad particular al etanol. Los cambios en la fluidez de la membrana, pueden manifestarse por la alteración de varios eventos bioquímicos intracelulares como la biosíntesis, la liberación o la degradación de varios neurotransmisores y proteínas. El contenido de las encefalinas se modifica en el cerebro de la rata después de la administración aguda y crónica de varios fármacos, como el pentilenetetrazol, lidocaína y morfina. En el presente trabajo se estudió el efecto del etanol, administrado en forma crónica y aguda, sobre la concentración de encefalinas, por medio de la técnica de radioinmunoensayo, en amígdala, cuerpo estirado, hipotálamo e hipocampo de la rata; así como la liberación in vitro de Met-encefalina (ME) a partir de rebanadas del cuerpo estriado en los mismos modelos experimentales. Un grupo de animales fue sometido al etanol crónico, mediante la ingesta de una mezcla de etanol-agua al 5, 10 y 20% (v/v), como única fuente de líquidos, con 15 días de duración en cada una de las dosis. En el grupo de ratas sometido al experimento agudo, éstas se inyectaron con etanol por vía intraperitoneal a una dosis de 3 g/kg y se sacrificaron a los 10, 20, 40 y 80 minutos después de la inyección. La liberación in vitro de Met-encefalina, se realizó en los mismos modelos experimentales. Los resultados del presente trabajo muestran que en el etanol crónico, la concentración de encefalinas disminuye de manera significativa en todas las estructuras analizadas, excepto en el hipocampo, en donde la Leucina Encefalina (LE) no sufre modificaciones. En el modelo agudo, también encontramos una reducción del contenido de encefalinas, pero la respuesta fue diferente en función del péptido, estructura y tiempo analizado. A los 10 minutos después de la inyección con etanol la LE disminuye su concentración en todas las estructuras, excepto en el hipocampo, en donde nuevamente no tiene cambios. En el mismo tiempo la ME sólo se reduce en la amígdala y en el hipocampo, en el cuerpo estriado el efecto es tardío y se presenta hasta los 20 minutos. La liberación in vitro de ME no tiene cambios con respecto a su control, tanto en el modelo crónico como en el agudo, a los 20 y 80 minutos de la inyección con etanol. La liberación de ME sólo se incrementó significativamente, 2 minutos después de inyectado el etanol. Los mecanismos a través de los cuales el etanol puede modificar el contenido y liberación de encefalinas, son discutidos.Item Ethanol-induced changes in proenkephalin mRNA expression in the rat nigrostriatal pathway(2008) Méndez, Milagros; Morales-Mulia, Marcela; Pérez-Luna, José Manuel; Departamento de Neuroquímica, Calzada México Xochimilco 101, Col. San Lorenzo Huipulco, 14370, México D.F., México.; ubach@imp.edu.mx